ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПЕЙЕРОВЫХ БЛЯШЕК ТОНКОЙ КИШКИ БЕЛЫХ КРЫС В НОРМЕ

Гринь В. Г.

МОРФОЛОГИЯ

Научная статья.

Ключевой структурой пейеровых бляшек, в которой осуществляется инициация иммунных реакций, является, покрывающий их апикальные отделы, поляризованный монослой разных по специализации типов энтероцитов, среди которых выделяются в основном абсорбционные, бокаловидные и так называемые М-клетки. Целью исследования было проведение иммуногистохимического анализа и выяснения зон преимущественной локализации основных типов иммунокомпетентных клеток пейеровых бляшек тонкой кишки белых крыс в норме. Объект и методы исследования. В эксперименте задействовано 30 белых крыс-самцов репродуктивного возраста. Для исследования использованы участки тонкой кишки, в которых находились пейеровы бляшки. Иммуногистохимическую оценку клеточного состава и иммунных клеточных реакций в пейеровых бляшках, их лимфоидных узелках и лимфоидно-ассоциированном эпителии выявляли по экспрессии Т- и В-клеточных кластеров дифференцировки (CD3, CD79), маркера плазматических клеток (CD38), маркера макрофагов (CD68 (КР1)), маркера дендритных клеток (CD23), маркера эпителиальных клеток ПАН-цитокератина (Cytokeratin PAN AE1/AE3). Использовались первичные моноклональные антитела (МКАТ) фирмы Thermo scientific (Германия), Rady-to-Use. Результаты подсчитывали с помощью окулярной сетки Автандилова в 10 произвольно выбранных полях зрения при увеличении х400. Комплекс морфологических исследований проводился на микроскопе Primo Star (Carl Zeiss) с использованием программы AxioCam (ERc 5s). Результаты работы. В итоге иммуногистохимического анализа пейеровых бляшек тонкой кишки интактных животных получены обобщенные данные о количественном соотношении в них между основными популяциями иммунокомпетентных клеток. Выводы. Основную массу иммунокомпетентных клеток составили В-лимфоциты (около 47%) и Т-лимфоциты (около 35%), тогда как на долю плазмацитов, макрофагов и дендритных клеток приходилось примерно по 5% на каждые из них. Но при этом не удалось получить не только данных о количестве в лимфоидно-ассоциированном эпителии пейеровых бляшек М-клеток, но даже оказалось безрезультатным стремление к их более четкой элективной идентификации

иммуногистохимический метод, пейеровы бляшки, лимфоидно-ассоциированный эпителий, М-клетки, дендритные клетки, плазмоциты, В- и Т-лимфоциты.

1. Dillon A, Lo DD. M Cells: Intelligent Engineering of Mucosal Immune Surveillance. Front. Immunol. 2019;10:1499. DOI: 10.3389/ fimmu.2019.01499
2. Bykov AS, Karaulov AV, Tsomartova DA, Kartashkina NL, Goryachkina VL, Kuznetsov SL, i dr. M-kletki – odin iz vazhnykh komponentov v initsiatsii immunnogo otveta v kishechnike. Infektsiya i immunitet. 2018;8(3):263-72. Dostupno: https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018- 3-263-272 [in Russian].
3. Kanaya T, Ohno H. The Mechanisms of M-cell Differentiation. Biosci Microbiota Food Health. 2014;33(3):91-7. DOI: 10.12938/bmfh.33.91
4. Da Silva C, Wagner C, Bonnardel J, Gorvel JP, Lelouard H. The Peyer’s Patch Mononuclear Phagocyte System at Steady State and during Infection. Frontiers in immunology. 2017;8:1254. DOI: 10.3389/fimmu.2017.01254 Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ articles/PMC5630697/
5. Morikawa M, Tsujibe S, Kiyoshima-Shibata J, Watanabe Y, Kato-Nagaoka N, Shida K, et al. Microbiota of the Small Intestine Is Selectively Engulfed by Phagocytes of the Lamina Propria and Peyer’s Patches. PloS one. 2016;11(10):e0163607. DOI: 10.1371/journal.pone.0163607 Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5049916/
6. Lelouard H, Fallet M, de Bovis B, Méresse S, Gorvel JP. Peyer’s patch dendritic cells sample antigens by extending dendrites through M cellspecific transcellular pores. Gastroenterology. 2012;142(3):592-601. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/ S0016508511016374
7. Hryn VH, Kostylenko YuP, Korchan NA, Lavrenko DA. Structural form of the follicle-associated epithelium of peyers’ patches of the albino rats’ small intestine. Georgian medical news. 2019;9(294):118-23. Available from: http://www.geomednews.org/shared/issues/med294.pdf
8. Hryn V. Internal structure of the lymphoid nodules of the peyer’s patches of small intestine in albino rats. Georgical Medical News. 2019;11(296):122-6. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31889718
9. Rybakova AV, Makarova MN. Sanitarnyy kontrol’ eksperimental’nykh klinik (vivariyev) v sootvetstvii s lokal’nymi i mezhdunarodnymi trebovaniyami. Mezhdunarodnyy vestnik veterinarii. 2015;4:81-9. Dostupno: https://rucont.ru/efd/379080 [in Russian].
10. Dobrelya NV, Boytsova LV, Danova IV. Pravova baza dlya provedennya etychnoyi ekspertyzy doklinichnykh doslidzhenʹ likarsʹkykh zasobiv z vykorystannyam laboratornykh tvaryn. Farmakolohiya ta likarsʹka toksykolohiya. 2015;2:95-100. Dostupno: http://www.irbis-nbuv. gov.ua/cgi-bin/irbis_nbuv/cgiirbis_64.exe?I21DBN=LINK&P21DBN=UJRN&Z21ID=&S21REF=10&S21CNR=20&S21STN=1&S21FMT=ASP_ meta&C21COM=S&2_S21P03=FILA=&2_S21STR=flt_2015_2_16 [in Ukrainian].
11. Svitlychnyy O, Berehelya I. Administratyvnyy zakhyst tvaryn, yaki vykorystovuyutʹsya v naukovykh eksperymentakh, navchalʹnomu protsesi ta vyrobnytstvi biolohichnykh preparativ, vid zhorstokoho povodzhennya. Pidpryyemnytstvo, hospodarstvo i pravo. 2017;2:150-4. Dostupno: http://www.irbis-nbuv.gov.ua/cgi-bin/irbis_nbuv/cgiirbis_64.exe?I21DBN=LINK&P21DBN=UJRN&Z21ID=&S21REF=10&S21CNR=20&S21STN =1&S21FMT=ASP_meta&C21COM=S&2_S21P03=FILA=&2_S21STR=Pgip_2017_2_30 [in Ukrainian].
12. Avtandilov GG. Osnovy kolichestvennoy patologicheskoy anatomii [monografiya]. M.: Meditsina; 2002. 240 s. Dostupno: https://www. mmbook.ru/catalog/patanatomija-gistologija-morfologija/105036-detail [in Russian].
13. Fal’chuk YL, Markov AG. Izucheniye bar’yernykh kharakteristik epiteliya peyyerovykh blyashek krysy. Vestnik SPbGU. Seriya 3: Biologiya. 2015;3(3):75-86. Dostupno: http://proxy.library.spbu.ru:2110/item.asp?id=24307669 [in Russian].
14. Al’berts B, Dzhonson A, L’yuis D. Molekulyarnaya biologiya kletki: v 3-kh tomakh. M.: Izhevsk: NITS «Regulyarnaya i khaoticheskaya dinamika», Institut komp’yuternykh issledovaniy. 2013;III. 1028 s. Dostupno: http://chembaby.com/wp-content/uploads/2015/12/MBK3.pdf [in Russian].
15. Kucharzik T, Lügering N, Schmid KW, Schmidt MA, Stoll R, Domschke W. Human intestinal M cells exhibit enterocyte – like intermediate filaments. Gut. 1998 Jan;42(1):54-62. DOI: 10.1136/gut.42.1.54
16. Madara JL. Functional morphology of Epithelium of the Small Intestine. Comprehensive Physiology. Handbook of Physiology, The Gastrointestinal System, Intestinal Absorption and Secretion. 2011;19:83-120. Available from: https://doi.org/10.1002/cphy.cp060403
17. Neutra MR, Mantis NJ, Kraehenbuhl JP. Collaboration of epithelial cells with organized mucosal lymphoid tissues. Nature Immunology. 2001;2:1004-9. DOI: 10.1038/ni1101-1004

«Вестник проблем биологии и медицины» Выпуск 1 (155), 2020 год, 292-296 страницы, код УДК 616.341:599.323.4

10.29254/2077-4214-2020-1-155-292-296