Алгоритм получения аутологических мезенхимальних клеток в эксперименте

Торяник И. И., Колесник В. В.

МЕТОДЫ И МЕТОДИКИ

Научная статья.

В представленной статье содержится информация относительно создания унифицированого рабочего алгоритма, касающегося получения и контроля аутологических стволовых мезенхимальных клеток (АСМК) в эксперименте. Последний проводили на самцах крыс линии Вистар 3-х месячного возраста, которые содержались в стандартних условиях климат-контроля вивария Харковской академии последипломного образования (ХМАПО) МЗ Украины. Животным с моделированным ишемическим інсультом дозировано в определенное время (1-е, 3-и, 7-е, 14-е сутки) тремя отработанными способами (внутривенный, интракраниальный, субокципитальный) вводили суспензию АСМК. Наблюдение за крысами осуществлялось в продолжение 28 суток. Особей выводили из эксперимента путем передозирования амфитаминово-го наркоза. Собственно алгоритм состоял из семи последовательных этапов (виделения, культивирования АСМК, детальной морфологической характеристики, установления жизнеспособности, индукции диферен-цирования, имуноцитохимического подтверждения последнего, фенотипирования, окраски прижизненным красителем РКН 26).

алгоритм, аутологические стволовые мезенхимальные клетки (АСМК), самцы крыс линии Вистар, культивирование, диференцировка, фенотипирование, краситель РКН 26.

1. Паляница С. С. Теоретичні основи використання трансплантації нейтральних стовбурових клітин при ішемічних ураженнях головного мозку / С. С. Паляниця, О. Л. Кухарчук // Трансплантологія. - 2007. - № 1. - С. 203-208.
2. Сравнительная эффективность внутривенного введения мезенхимальных стволовых клеток костного мозга крысам, у которых моделировали паркинсоноподобный синдром / В. А. Пятикоп, М. А. Мсаллам, Е. А Щегельская [и др.] // Український нейрохірургічний журнал. - 2014. - № 2. - С. 55-61.
3. Стволовые клетки: проблемы контроля, безопасности, разработки и применения / Н. Бунятян, А. Яворский, В. Ряже-нов [и др.] // Врач. - 2009. - № 6. - С. 2-5.
4. Шаймарданова Л. Р Стволовая система / Л. Р. Шаймарданова, В. С. Пикалюк // Морфологія. - 2008. - Т. 11, № 1. -С.16-21.
5. Abody K. Translating stem cell studies to the clinik for CNS repair: current state of the art and the need for a Rosetta Stone / K. Abody, A. Capela // Neuron. - 2011. - Vol. 70 (4). - P 597-613.
6. Hunter: Statistics for Experimenters [электронный ресурс] / George E. P. Box, J. Stuart Hunter, G. William // Design, Innovation, and Discovery. - 2nd Edition. - 2005. - Режим доступа: http://www. amazon. com /Statistics - Experimenters -Innovation - Discovery - Edition/ dp/04/0471718130.
7. Clinical studies in stem cells transplantation for stroke: a review / A. Bersano, E. Ballabio, S. Lanfranconi [et al.] // Current Vascular Pharmacology. - 2010. - Vol. 8. - Р 29-34.
8. Distribution of vascular endothelial growth factor receptor-3/Flt4 mRNA in adult rat central nervous system / Y Hou, Y -J. Shin, E. Jiwon Han [et al.] // J. Chemical Neuroanatomy. - 2011. - Vol. 42. - P. 56-64.
9. Gudas L. J. Retinoids induce stem cell differentiation via epigenetic changes / L. J. Gudas // Semin Cell Development Biology. - 2013. - № 4. - P 278-283.
10. Gudas L. J. Retinoids regulate stem cell differentiation / L. J. Gudas, J. A. Wagner // J. Cell Physiol. - 2011. - № 2. - P 322330.
11. Jablonska А. Stroke induced brain changes: implications for stem cell transplantation / A. Jablonska, B. Lukomska // Acta Neurobiol. Exp. - 2011. - Vol. 71. - Р 74-85.
12. Kaca-Orynska M. Neuron-specific enolase and S 100B protein as predictors of outcome in ischaemic stroke / M. Kaca-Orynska, R. Tomasiuk, A. Friedman // Neurol. Neurochir. Pol. - 2010. - Vol. 44, № 5. - P 459-463.
13. Neurobiochemical markers of brain damage in cerebrospinal fluid of acute ischemic stroke patients / R. Brouns, B. De Vil, P. Cras [et al.] // Clin. Chem. - 2010. - Vol. 56, № 3. - P. 451-458.
14. Sahota P. Investigational therapies for ischemic stroke: neuroprotection and neurorecovery / P. Sahota, S. I. Savitz // Neurotherapeutics. - 2011. - Vol. 8. - Р 434-51.
15. Serum glial fibrillary acidic protein is a highly specific biomarker for traumatic brain injury in humans compared with S-100B and neuron-specific enolase / M. Honda, R. Tsuruta, T. Kaneko [et al.] // J. Trauma. - 2010. - Vol. 69, № 1. - P 104-109.
16. Sinden J. D. Stem sell in stroke treatment: the promise and challenges / J. D. Sinden, K. W. Muir // International Journal of Stroke. - 2012. - Vol. 7. - P 426-434.
17. Smith H. K The potential of stem cell therapy for stroke: is PISCES the sign? / H. K. Smith, F N. Gavins // FASEB J. - 2012. -Vol. 26. - Р 2239-2252.
18. Yu Luo Cell-based therapy for stroke / Yu Luo // J. Neural. Transm. - 2011. - Vol. 118. - P 61-74.

«Вестник проблем биологии и медицины» Выпуск 1 Том 1 (117), 2015 год, 207-211 страницы, код УДК 611-018. 82:612-616. 1-005. 4-085