Использование fret-метода для оценки взаимодействия липидных капель и митохондрий в клетках коры надпочечников крыс при инкубации в гипертоническом растворе хлорида натрия

Юрчук Т. А., Бондаренко Т. П.

МЕТОДЫ И МЕТОДИКИ

Научная статья.

Использован новый подход для оценки взаимодействия липидных капель и митохондрий клеток коры надпочечников (ККН) при инкубации в гипертоническом растворе хлорида натрия. Показано, что исследуемые органеллы ККН в изотоническом растворе находятся в пределах расстояния, при котором реализуется FRET. При этом эффективность FRET составила 16,9 ± 1,1 %. В случае инкубации ККН с 0,75М раствором хлорида натрия показатель эффективности FRET увеличивался до 33,7 ± 2,1%, а расстояние между зондами составило 60 Е, что соответствует двойной ширине фосфолипидного бислоя мембраны митохондрий.

митохондрии, липидные капли, эффективность FRET, стероидогенез, криоконсервирование

1. Атраментова Л. А. Статистические методы в биологии / Л. А. Атраментова, О. М. Утевская. - Горловка : Видавництво Ліхтар, 2008. - 248с.
2. Белоус А. М. Криобиология / А. М. Белоус, В. И. Грищенко. - Киев, Наукова думка, 1994. - 432 с.
3. Влияние инкубации в гипертонических растворах хлорида натрия на изменения объема адренокортикоцитов и расположение в них липидных капель / Т. А. Юрчук, Н. А. Чернобай, Г. А. Божок [и др.] // Пролемы криобиологии. -2010. - Т. 20, № 3. - С. 282 - 288.
4. Регидратированные адренокортикоциты как модель криоконсервированных стероидпродуцирующих клеток / Г. В. Дудецкая, Т. А. Юрчук, В. Д. Устиченко [и др.] // Проблемы криобиологии. - 2006. - Т. 16, № 4. - С. 432.
5. Устиченко В. Д. Морфофункціональні характеристики клітин надниркових залоз при дії різних режимів заморожування : дис. на здобуття наукового ступеня канд. біол. наук : спец. 03. 00. 19 «Кріобіологія та кріомедицина» / Вікторія Дмитрієвна Устиченко. - Харьков, 2006. - 170 с.
6. Функциональная активность адренокортикоцитов крыс после инкубации в криозащитных средах на основе ДМСО, содержащих эмбриональную телячью сыворотку / Т. А. Юрчук, Г. А. Божок, Н. М. Алабедалькарим [и др.] // Проблемы криобиологии. - 2014. - Т. 1, № 1. - С. 47 - 58.
7. Binding of lipid droplets and mitochondria to intermediate filaments in rat Leydig cells / G. Almahbobi, L. J. Williams, X-G. Han [et al.] // Journal of reproduction and Fertility. - 1993. - Vol. 98, № 1. - P. 209 - 217.
8. FRET microscopy demonstrates molecular association of non-specific lipid transfer protein (nsL-TP) with fatty acid oxidation enzymes in peroxisomes / F. S. Wouters, P. I. Bastiaens, K. W. Wirtz [et al.] // EMBO Journal. - 1998. - № 17. - P. 7179 - 7189.
9. Jares-Erijman E. A. FRET imaging / Jares-Erijman E. A., Jovin T. M. // Nat. Biotechnol. - 2003. - Vol. 21, № 11. - P. 387 - 395.
10. Rahul R. A practical guide to single-molecule FRET / R. Rahul, H. Sungchul, H. Taekjip // Nature Methods. - 2008. - Vol. 5, № 6. - P. 507 - 516.
11. 11. Sanderson J. T. The steroid hormone biosynthesis pathway as a target for endocrine-disrupting chemicals / J. T. Sanderson // Toxicological Sciences. - 2006. - Vol. 94, № 1. - P. 3 - 21.
12. Spдt A. Control of aldosterone secretion: a model for convergence in cellular signaling pathways / A. Spдt, L. Hunyady // Physiol. Rev. - 2004. - Vol. 84, № 1. - P. 489 - 539.
13. Tinoco J. I. Biological mechanisms, one molecule at a time / J. I. Tinoco, L. Ruben, J. Gonzalez // Genes and Development. - 2011. - № 25. - P. 1205-1231.

«Вестник проблем биологии и медицины» Выпуск 1 Том 1 (117), 2015 год, 212-215 страницы, код УДК 612. 43. 014. 1.085. 23. 086. 3:577. 336