АНАЛІЗ СТРУКТУРНО-ФУНКЦІОНАЛЬНОГО СТАНУ ГЕМОПОЕТИЧНИХ ПРОГЕНІТОРНИХ КЛІТИН КОРДОВОЇ КРОВІ ЛЮДИНИ ПІСЛЯ КРІОКОНСЕРВУВАННЯ З ДМСО І АНТИОКСИДАНТАМИ ТА ПЕРЕНЕСЕННЯ ДО УМОВ, ЩО МОДЕЛЮЮТЬ ФІЗІОЛОГІЧНІ

Макашова О. Є., Зубова О. Л., Зубов П. М., Бабійчук Л. О.

ФІЗІОЛОГІЯ

Наукова стаття

У роботі проведено порівняльний аналіз впливу кріопротекторних сумішей, що містять різні концентрації проникаючого кріопротектора ДМСО та антиоксидантів, при кріоконсервуванні гемопоетичних прогеніторних клітин кордової крові людини та після перенесення їх до умов, наближених до фізіологічних. Показано, що додавання до кріозахисного середовища аскорбінової кислоти, N-ацетил-L-цистеїна або глутатіона сприяє підвищенню показників збереженості та життєздатності гемопоетичних прогеніторних клітин після перенесення їх до умов, що моделюють фізіологічні. Найбільший цитопротекторний ефект спостерігається в пробах, кріоконсервованих із 7,5 і 10% ДМСО з додаванням глутатіону в концентрації 1 та 3 мМ, де зберігається до 80% гемопоетичних клітин в життєздатному стані, порівняно з двома іншими анти-оксидантами в оптимальних концентраціях, які забезпечують життєздатність клітин до 70%.

гемопоетичні прогеніторні клітини кордової крові, кріоконсервування, ДМСО, аскорбінова кислота, N-ацетил-L-цистеїн, глутатіон

1. Armitage S. Cord blood banking standards: autologous versus altruistic. Front Med (Lausanne). 2015;2:94.
2. Babijchuk LA, Makashova EE, Zubova OL, Zubov PM. Evaluation of the antioxidant properties of ascorbic acid at cryopreservation of cord blood nucleated cells with DMSO. Transplantation – present, past and future; 2014 Nov 7; Kyiv. Klitynna ta organna transplantologiya. 2015;2(2):166.
3. Ballen KK. New trends in umbilical cord blood transplantation. Blood. 2005;105:3786-92.
4. Castillo-Martín M, Bonet S, Morató R, Yeste M. Supplementing culture and vitrification-warming media with l-ascorbic acid enhances survival rates and redox status of IVP porcine blastocysts via induction of GPX1 and SOD1 expression. Cryobiology. 2014;68(3):451-8.
5. Chakraborty SK, Banu LA, Rahman MF, Paul S. Cord blood stem cells – a dream for future medicine. Mymensingh Med J. 2014;23(3):614-20. 
6. Cheng Н, Gao Y, Shi M, Hu L. Antioxidant N-acetyl-L-cysteine increases engraftment of human hematopoietic stem cells in immune-deficient mice. Blood. 2014;124(20):45-8.
7. Davis JM, editor. Basic cell culture. A practical approach. Oxford University Press, Oxford; 2002. 382 р.
8. Garcia-Krauss A, Ferrada LA, Astuya N, Salazar K, Cisternas P, Martinez F, et al. Dehydroascorbic acid promotes cell death in neurons under oxidative stress: a protective role for astrocytes. Mol Neurobiol. 2016;53(9):5847-63.
9. Maeshima Y, Makino H. Molecular mechanism of cell injury. Contrib Nephrol. 2003;139:32-43.
10. Mykhailova OY, Makashova OY, Zubov PM, Babijchuk LA.Improving of cryoprotectant media for human cord blood nucleated cells cryopreservation. IIR Workshop on cold Applications in Life Sciences; 2016 Sept 8-9; Dresden; 2016. р. 131-4.
11. Partyka A, Niżański W, Bajzert J, Lukaszewicz E, Ochota M. The effect of cysteine and superoxide dismutase on the quality of post-thawed chicken sperm. Cryobiology. 2013;67(2):132-6.
12. Rocha V, Gluckman E. Eurocord-Netcord registry and European blood and marrow transplant group. Improving outcomes of cord blood transplantation: HLA matching, cell dose and other graft- and transplantation-related factors. Br J Haematol. 2009;147(2):262-74.
13. Schafer FQ, Buettner GR. Redox environment of the cell as viewed through the redox state of the glutathione disulfide/glutathione couple. Free Radic Biol Med. 2001;30:1191-212.
14. Wang L, Luo X, Li C, et al. Triethylenetetramine synergizes with pharmacologic ascorbic acid in hydrogen peroxide mediated selective toxicity to breast cancer cell. Oxid Med Cell Longev. 2017;2017:3481710.
15. Zembruski NC, Schmid I, Stache V, Weiss J. 7-Aminoactinomycin D for apoptosis staining in flow cytometry. Anal Biochem. 2012;429(1):79-81.

«Вістник проблем біології і медицини» Випуск 1 Том 1 (142), 2018 рік , 384-388 сторінки, код УДК 612.649.011.87.014.3:615.014.41:547.569.2

10.29254/2077-4214-2018-1-1-142-384-388